16S、18S、ITS等擴增子測序(二代) 一步到位檢測環境微生物多樣性


擴增子測序是對特定長度的PCR產物或捕獲的片段進行測序,分析序列中的變異。

16S/18S/ITS等擴增子測序即通過提取環境樣品的DNA,選擇合適的通用引物擴增16S/18S/ITS的目標區域,

通過檢測目標區域的序列變異和豐度,以研究環境微生物多樣性及群落組成差異。

16S/18S rDNA為編碼原/真核生物核糖體小亞基rRNA的DNA序列。

ITS分為兩個區域:ITS1位于真核生物rDNA序列18S和5.8S之間,ITS2位于5.8S和28S之間。


16S/18S/ITS等擴增子測序(三代)

一次分析多個高變區信息,還原真實微生物群落結構


全長擴增子(16S/18S/ITS)測序基于Pacbio長讀長測序平臺,以16S為例,可以一次性獲得9個高變區序列信息,獲得注釋到“種”的分類鑒定!不僅可以提高物種鑒定分辨率,還可以通過全長序列進行準確的物種注釋,從而更加真實地還原樣本中微生物的群落結構。

應用方向


細菌多樣性研究:16S全長

真菌多樣性研究:ITS全長

真核微生物多樣性研究:18S全長

功能基因研究:反硝化細菌nirS、固氮菌nifH等




樣本類型


土壤/污泥/沉積物/腐殖質

水體濾膜(孔徑 0.22-0.45μm/直徑 3-4cm)

拭子

瘤胃液/發酵液/組織液(離心有明顯沉淀)

糞便/腸道內容物

動物/人組織

血漿

鮮奶




應用方向


醫學領域:疾病與人體微生物間關系,如代謝類疾病、消化類疾病、自身免疫性疾病、腫瘤癌癥、神經類疾病及其他疾病等

環境領域:某一特定環境(霧霾、沙塵等污染環境,住宅、商場等生活環境)的微生物群落組成,有機肥發酵處理、污水治理、石油降解、水體及海洋等微生物群落分布和組成等

畜牧領域:腸道、瘤胃等微生物與動物繁殖、生長發育、營養健康、免疫和疾病治療等的互作關系

農業領域:根際微生物與植物互作、農業耕作/施肥處理與土壤微生物群落等

生物能源:特殊功能的菌株、工程菌的開發

特殊極端環境:極端環境條件下的微生物類群研究


我們的優勢


周期短, 性價比高:采用最新測序平臺,通量更高,速度更快,運行時間更短,周期最短可達10天

科學方案設計:從材料選取,建庫測序,到數據分析, 每一步都需要科學、縝密的設計,以保障高質量研究成果



常見問題


1.16S測序哪個區域比較合適?

諾禾致源提供的幾個測序區域來自文獻調研,但是目前并沒有研究表明哪個測序區域更好。有文章研究表明土壤樣本,16S V4區(515F-806R)比較適合做擴增子研究,可檢測的物種多樣性更豐富, 并且可重復性強(PNAS. 2013. 110(16): 6548-6553.)。

2.若關注環境中的真核微生物多樣性,ITS測序和18S測序哪個更好?


ITS測序主要是針對真菌多樣性的研究,注釋準確度高;18S測序針對的是真核微生物,注釋到的范圍廣,但是就真菌來說精確度相對較低;可根據研究目的合理選擇測序方案。


3.擴增子與宏基因組的區別?

擴增子主要分為16S、18S、ITS測序,關注環境樣本中的物種組成,該技術物美價廉,實用性高。宏基因組關注環境樣本中的物種組成、功能組成及代謝通路等信息,該技術深入挖掘環境樣本功能層面的信息。


4.樣本送到公司,什么時候可以拿到結果?

自樣本檢測合格之后開始計算周期,包括建庫、測序、數據分析、結題。擴增子周期共計20個自然日。



常見問題


1. 三代擴增子有什么優勢?

三代擴增子可以獲得更準確的物種注釋結果,一次實現多個高變區的擴增和測序,種水平注釋結果可信度更高。


2. 樣本送到公司,什么時候可以拿到結果?

三代擴增子可以獲得更準確的物種注釋結果,一次實現多個高變區的擴增和測序,種水平注釋結果可信度更高。自樣本檢測合格之后開始計算周期,包括建庫、測序、數據分析、結題。全長擴增子周期共計30個自然日。